本项目为共建广东省农业科技示范市项目，由广东省农业科学院动物卫生研究所、佛山市农业科学研究所、广东顺安丰泰水产科技有限公司联合开展，总经费60万元。项目执行期间（2021.1-2022.12），项目组完成佛山地区70家鳜、鲈苗种/养殖企业的病毒病流行病学调查；建立鳜、鲈重大病毒病的Nested-RAA、Taqman探针法等快速诊断技术；开发MRV/LMBV口服亚单位疫苗并开展鳜、鲈免疫的大塘实验；开展鳜、鲈病害防控技术培训，推广项目技术成果。

    1. 在引物设计优化、特异性、灵敏度、符合率等试验分析的基础上，项目组建立MRV/LMBV、NNV nested-RAA快速诊断技术，其中MRV/LMBV nested-RAA获得国家发明专利授权。在引物与探针设计优化、特异性、灵敏度、稳定性、符合率等试验分析的基础上，项目组建立MRV/LMBV、ISKNV、RSIV、MSRV/SCRV的Taqman荧光探针PCR方法并组装试剂盒；依托项目组的鳜、鲈病毒病检测技术，项目组在佛山市现代渔业科技园（佛山顺德乐从镇上华村）建立塘边水产病害诊断工作站1处，为佛山市及其周边养殖一线的病害防控提供了有效支撑。

    2. 项目组对佛山地区41家加州鲈养殖企业与29家鳜鱼养殖企业进行了流调采样，其中南海、顺德、三水的病毒阳性场（至少检出1种病毒）比例分别为33.3%、54.5%、46.8%，检测结果表明虹彩病毒成为鳜、鲈的主要流行病原，有效指导鳜鲈病毒病早期防控。

    3. 通过生物信息学分析筛选了12个MRV/LMBV的口服亚单位疫苗候选分子，构建重组表达菌株作为候选口服疫苗；灌喂免疫加州鲈幼鱼，比较了1次免疫、3次免疫的效果；结果表明3次免疫可以使RPS由28%提高到96%，优选3个（相对保护率42.3%、56%、96%）作为口服亚单位疫苗。进一步开展拌料投喂实验，比较了①1×108cfu/尾，3次免疫；②1st免2×107cfu/尾，2nd免4×107cfu/尾，3rd免8×107cfu/尾；③1st免3×107cfu/尾，2nd免6×107cfu/尾，3rd免9×107cfu/尾的免疫保护效果。结果表明，拌料投喂采用方案①最高可以达到60%的RPS，方案③最高可以达到61.29%的RPS，采用方案②最高可以达到64.5%的RPS，为佛山市及其广东省MRV/LMBV的防控提供技术手段。

    4. 采用MRV/LMBV口服亚单位疫苗在佛山青岐于2022.1-2022.8免疫4万尾加州鲈鱼苗，2022.6-2022.11免疫4.5万尾鳜鱼鱼苗；免疫鳜、鲈未感染MRV/LMBV，成功上市，成活率>90%。

    5. 项目组在佛山举办“水产健康养殖技术培训班”，开展了《佛山地区鳜、鲈重大病毒病的流行情况与免疫防控技术》、《基于物联网的鳜、鲈病害诊断工作站与检测技术》培训，参加培训的企事业单位20余家，人员40余人。此外项目组以现场调研讨论方式对7家佛山企业进行鳜、鲈病毒病诊断技术培训及病害防控技术指导。